一种末端脱氧核糖核苷酸转移酶TdT的纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN202111661797.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114317486A | 公开（公告）日 | 2022-04-12 |
| 申请公布号 | CN114317486A | 申请公布日 | 2022-04-12 |
| 分类号 | C12N9/12（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王绪德;杨畅;李信志;刘义;雷文龙;赵红洲 | 申请（专利权）人 | 武汉赛维尔生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人 | 孙凤侠 |
| 地址 | 430200湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1.2期22栋5层2室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种末端脱氧核糖核苷酸转移酶TdT的纯化方法。该方法针对末端脱氧核糖核苷酸转移酶TdT的纯化进行了大量研究，根据蛋白的性质探究出了最影响该蛋白收率和纯度的关键影响因素，包括蛋白洗脱液、纯化方式、洗脱收集等，所述蛋白洗脱液中含有20～25mM咪唑、10～25mM Trisbase和0.4～0.5M NaCl，pH为7.5～8.0；并进行了系统性的设计和优化，所提出的方案可以显著提升蛋白的得率和纯度，且无核酸残留；而且本发明纯化策略方便进一步等比放大，能够大规模量产，在生产高纯度、无核酸残留、品质好的末端脱氧核糖核苷酸转移酶TdT蛋白方面具有很好的应用价值。 |
