一种动物组织裂解与直接PCR扩增的方法
基本信息
申请号 | CN202111648074.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN114350653A | 公开(公告)日 | 2022-04-15 |
申请公布号 | CN114350653A | 申请公布日 | 2022-04-15 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/686(2018.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 吝婷婷;陈贤军;冯飞;王绪德;赵红洲 | 申请(专利权)人 | 武汉赛维尔生物科技有限公司 |
代理机构 | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人 | 段卉 |
地址 | 430200湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1.2期22栋5层2室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种动物组织裂解与直接PCR扩增的方法。裂解液成分包括:10~200mM Tris(pH 8.0)、5~10mM EDTA、质量浓度0.1%~0.25%SDS、质量浓度1%~5%DTT和100~500μg/mL蛋白酶K组成的混合液,采用10~200mM KCl作为裂解终止液,终止裂解液与裂解液之间的体积比为1~2:1~1.5。还提供了一种与裂解液配套的PCR增强剂:1~5M甜菜碱、1%~10%DMSO和0.001%~0.15%明胶,提高PCR扩增效率。本发明使组织裂解产物直接作为PCR反应模板,省去繁琐步骤,节省时间与成本,减少样本损失,实现高通量快速检测。 |
