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一种液体生物样品中选择性去除宿主核酸的方法

基本信息

申请号	CN201911121617.8	申请日	-
公开（公告）号	CN112813137A	公开（公告）日	2021-05-18
申请公布号	CN112813137A	申请公布日	2021-05-18
分类号	C12Q1/6806;C12Q1/04	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	江山;庞白冰	申请（专利权）人	西安中科茵康莱医学检验有限公司
代理机构	成都弘毅天承知识产权代理有限公司	代理人	尹洁芳
地址	710019 陕西省西安市高新区西部大道60号
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种液体生物样品中选择性去除宿主核酸的方法，属于分子生物学、体外分子诊断技术领域，所述方法包括如下步骤：（1）将液体生物样品与皂苷溶液混合均匀，室温下静置5‑30分钟，使宿主细胞等非目标成分的细胞特异性裂解，得混合物，混合物中皂苷的终浓度为0.02‑1.7％；（2）将混合物高速离心，离心后倒掉上清液，得到第一沉淀；（3）向第一沉淀中加入核酸酶反应液和核酸酶，核酸酶包含10‑200个酶单位，目的是降解样品中非目标成分，以宿主核酸为主；（4）将核酸酶灭活；（5）富集目标微生物2。可以检测出浓度低至约2.0CFU/mL的致病菌，满足对诸如血流感染等感染性疾病的临床诊断要求；本发明所使用的试剂和设备少，成本低，工艺简单，应用范围广泛。