基因DNA序列捕获探针的制备方法

基本信息

申请号 CN201410064762.8 申请日 -
公开(公告)号 CN103898210A 公开(公告)日 2014-07-02
申请公布号 CN103898210A 申请公布日 2014-07-02
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 谭海芹;洪旭涛;余文菁;张珊珊;余科;宓娅娜 申请(专利权)人 绍兴锐创生物科技有限公司
代理机构 杭州中成专利事务所有限公司 代理人 绍兴锐创生物科技有限公司
地址 312071 浙江省绍兴市袍江群贤路与中兴大道交叉口东南角5楼501室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基因DNA序列捕获探针的制备方法,技术方案为:1)、设计两条部分互补的引物,经退火处理后形成一个部分双链结构的开叉形接头,与目标基因的普通PCR扩增产物(A1)进行连接反应,得到两端带有接头的目标基因(A2);2)、针对接头序列设计相应的引物,对所述A2进行扩增,得到带有T7启动子的扩增产物(A3);3)、对上述产物(A3)进行定量后,在一定的条件下,加入带有生物素标记的NTP(其中UTP上标记生物素,其他ATP,CTP,GTP不标记),进行体外转录反应,最终得到带有生物素标记的RNA探针(基因DNA序列捕获探针)。