一种NK细胞体外扩增方法
基本信息
| 申请号 | CN201710375838.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106967682B | 公开（公告）日 | 2020-08-07 |
| 申请公布号 | CN106967682B | 申请公布日 | 2020-08-07 |
| 分类号 | C12N5/0783 | 分类 | - |
| 发明人 | 姚玲玲;杨苗;杨敏;孟得龙;宋丹;刘得娟 | 申请（专利权）人 | 北京焕生汇生物技术研究院有限公司 |
| 代理机构 | 西安中科汇知识产权代理有限公司 | 代理人 | 北京焕生汇生物技术研究院 |
| 地址 | 100041 北京市石景山区实兴大街30号院3号楼10层1002房间 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种NK细胞体外扩增方法，包括：(1)配制主要成分为50ng/ml抗CD3单克隆抗体+50ng/ml抗CD16单克隆抗体的试剂A、主要成分为300IU/ml IL‑2的试剂B和主要成分为20ng/ml IL‑12+20ng/ml IL‑15的试剂C，准备淋巴细胞分离液40ml作为试剂D；(2)取试剂A于T‑175培养瓶包被，4℃过夜；(3)处理外周血，得到细胞和血清；(4)重悬细胞，添加试剂D后离心收集PBMC；(5)将PBMC重悬于X‑VIVO15培养基中，添加试剂B、试剂C和自体血清，孵育；(6)分别在第3、6、9、12天补加培养基、试剂B、试剂C和自体血清，第14天收集细胞。本发明的有益之处在于：通过提前接种抗CD3单克隆抗体和抗CD16单克隆抗体，先对细胞进行筛选，所以在体外培养时提高了NK细胞的扩增倍数和纯度。 |
