一种CRISPR/Cpf1基因编辑系统及其构建方法和在赤霉菌中的应用
基本信息
| 申请号 | CN202110965413.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113584033B | 公开（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申请公布号 | CN113584033B | 申请公布日 | 2022-07-01 |
| 分类号 | C12N15/113（2010.01）I;C12N9/22（2006.01）I;C12N15/80（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I;C12N1/15（2006.01）I;C12P27/00（2006.01）I;C12R1/645（2006.01）N;CN 112760338 A,2021.05.07 Tian-Qiong Shi et al..CRISPR/Cas9-Based Genome Editing in the Filamentous Fungus Fusarium fujikuroi and Its Application in Strain Engineering for Gibberellic Acid Production..《ACS Synth Biol.》.2019,第8卷（第2期）,445-454.;李丹丹.基于CRISPR系统的丝状真菌基因组快速编辑.《中国优秀硕士学位论文全文数据库基础科学辑》.2019,A006-301.;肖晗 等.CRISPR-Cas系统编辑丝状真菌的进展与挑战.《合成生物学》.2021,第2卷（第2期）,274-286. | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 黄和;施天穹;杨彩玲;沈琦;彭倩倩 | 申请（专利权）人 | 南京师范大学 |
| 代理机构 | 南京苏高专利商标事务所（普通合伙） | 代理人 | - |
| 地址 | 210046江苏省南京市栖霞区文苑路1号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种CRISPR/Cpf1基因编辑系统及其构建方法和在赤霉菌中的应用，该系统为骨架质粒pCpf1Ff‑DR，包括Fncpf1基因、功能性crRNA基因、启动子pGPD、启动子pTRPC、强RNA聚合酶III型启动子5srRNA、潮霉素筛选标记hph。本发明系统效率高、通用性强、易于操作而被迅速应用于丝状真菌赤霉菌中，通过该基因编辑系统可用于赤霉菌中实现长达17kb的比卡菌素基因簇的敲除。本发明首次在赤霉菌中实现大片段基因敲除，且首次发现比卡菌素基因簇敲除有利于提高赤霉素产量，该方法有望进一步用于改造赤霉素工业菌，缩短菌株升级的时间，为提高赤霉素产量、增加经济效益提供了强有力保障。 |
