一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP-1或其类似物多肽的方法
基本信息
申请号 | CN201911373533.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111072783B | 公开(公告)日 | 2021-09-28 |
申请公布号 | CN111072783B | 申请公布日 | 2021-09-28 |
分类号 | C07K19/00(2006.01)I;C07K14/605(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 辛中帅;赵珊珊;文良柱;平康康;徐晓峰;李夷平 | 申请(专利权)人 | 万新医药科技(苏州)有限公司 |
代理机构 | 南京天华专利代理有限责任公司 | 代理人 | 杜静;张磊 |
地址 | 215123江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A4-213单元 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP‑1或其类似物多肽的方法,本发明设计的GLP‑1或其类似物的重组串联蛋白通式为:X‑(Y‑Z)n。其中:X为前导肽,Y为胰蛋白酶和CPB酶双酶切位点或Kex2酶和CPB酶双酶切位点及辅助序列,Z为GLP‑1或其类似物。n为串联重复数。通过大肠杆菌原核表达体系进行发酵诱导表达GLP‑1或其类似物的重组串联蛋白形成的包涵体无需变性剂即可完全溶解,溶解液经胰蛋白酶和CPB酶双酶切或Kex2酶和CPB酶双酶切获得GLP‑1或其类似物。本方法获得的GLP‑1或其类似物表达量高,酶切后GLP‑1目的蛋白收率及酶切后纯度高。 |
