人类单细胞线粒体高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒

基本信息

申请号 CN202010075342.5 申请日 -
公开(公告)号 CN111172157B 公开(公告)日 2021-11-09
申请公布号 CN111172157B 申请公布日 2021-11-09
分类号 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王洋;闫通帅;罗镓超;刘丽霞 申请(专利权)人 福州福瑞医学检验实验室有限公司
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 黄爽
地址 350011福建省福州市晋安区新店镇猫岭路9号C区厂房9#厂房4F
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种人类单细胞线粒体高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒。所述试剂盒包含线粒体基因组全环扩增引物、单细胞裂解液,高通量文库构建的末端修复、磷酸化、3’加腺苷酸组分,高通量文库构建的接头以及正、反向文库扩增引物等。本方法在基于线粒体基因组完整全环扩增的体系中实现了单个或几个细胞线粒体基因组DNA的高通量测序文库构建,同时规避了常规单细胞扩增体系带来的高脱靶率,高比例假阳性位点检出率,从而在单细胞层面摒除了线粒体突变检测中的大量弊端,实现了高灵敏度,精确度检测;同时由于本方法采用线粒体全环全长扩增的方式,可以在检出突变位点的同时,发现线粒体DNA的大片段重复和缺失。