一种牛肠激酶的cDNA片段、高效表达重组质粒及其基因工程菌和表达方法
基本信息
申请号 | CN201510039882.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN104561063A | 公开(公告)日 | 2015-04-29 |
申请公布号 | CN104561063A | 申请公布日 | 2015-04-29 |
分类号 | C12N15/57(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 周晓雷;董力;张世光;朱重悦;邹卫;黄岩;段普凡 | 申请(专利权)人 | 河北百奥生物制品有限公司 |
代理机构 | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 | 代理人 | 河北科技大学;河北百奥生物制品有限公司 |
地址 | 050000 河北省石家庄市裕华路70号河北科技大学(中校区) | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种牛肠激酶的cDNA片段,其核苷酸序列为SEQ?ID?No.4;本发明还涉及该cDNA片段构建的重组质粒和基因工程菌,另外还涉及上述基因工程菌的表达方法。本发明对ekl基因的密码子进行优化,优化后的ekl基因片段可以实现甲醇酵母对EKL基因的高效表达。本发明在ekl基因序列的C末端插入了组氨酸标签,以利于对目标蛋白的纯化。本发明对甲醇酵母的表达条件进行了优化,可以使重组的基因工程菌表达牛肠激酶的量再增加1倍,进一步提高发酵效率,提高牛肠激酶的生产能力。 |
