一种晶状体上皮干细胞的分离培养方法

基本信息

申请号 CN201510032551.0 申请日 -
公开(公告)号 CN104789521B 公开(公告)日 2017-11-07
申请公布号 CN104789521B 申请公布日 2017-11-07
分类号 C12N5/074(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 侯睿;蔡惠民;李欧俏 申请(专利权)人 广州康睿生物医药科技股份有限公司
代理机构 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 广州康睿生物医药科技股份有限公司
地址 510663 广东省广州市高新技术产业开发区科学城揽月路3号广州国际企业孵化器F区F616号房
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种晶状体上皮干细胞的分离培养方法,它包括以下步骤:(1)取晶状体前囊膜,剪成碎片,消化,将获得的细胞铺于包被有基质的培养瓶、培养板或培养皿中;(2)加入添加有含有15~25%FBS、50~150μg/L人表皮生长因子(FGF)、5‑10mg/L胰岛素、5‑10mg/L氢化可的松、5‑10mg/L霍乱弧菌毒素、0.01‑0.05mg/L3,3′,5‑碘‑L‑对羟基苯丙氨酸、1‑5mg/L腺嘌呤、5~10mg/L甘氨酸、6~12mg/L丙氨酸、10~16mg/L天冬酰胺、10~16mg/L天冬氨酸、12~18mg/L谷氨酸、8~15mg/L脯氨酸、7~14mg/L丝氨酸的MEM培养液,放入37℃孵箱中培养,2‑3天形成克隆,10‑14天可形成单层活性的晶体干细胞细胞。本发明还公开了一种晶状体上皮干细胞的分离培养液。本发明方法可以分离得到原代晶状体上皮干细胞,干细胞的活性高,本发明方法简便、易操作,应用前景良好。