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一种冻存细胞复苏的方法

基本信息

申请号	CN201810128819.4	申请日	-
公开（公告）号	CN108330098A	公开（公告）日	2018-07-27
申请公布号	CN108330098A	申请公布日	2018-07-27
分类号	C12N5/07	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	李杰;刘振云;徐华栋;王维;程丰伟	申请（专利权）人	安徽古一生物科技有限公司
代理机构	合肥市浩智运专利代理事务所（普通合伙）	代理人	安徽古一生物科技有限公司
地址	238000 安徽省合肥市巢湖市经济开发区管委会南三楼301室
法律状态	-

摘要

本发明提供一种冻存细胞复苏的方法，包括以下步骤：(1)清洗液的准备：准备第一离心管，加入DMEM无血清培养基和胎牛血清(FBS)，混匀后，放入水浴锅中预热；(2)冻存细胞的融化：从液氮中迅速取出细胞冻存管，迅速转移至水浴锅中使完全融化；(3)转移：将细胞冷冻液从冻存管中吸出，转移至第二离心管中，然后吸取适量清洗液逐滴加入到细胞冷冻液中，前期每次一滴，轻摇管身，使清洗液缓慢融入冷冻液中，加入1‑2ml清洗液后，可逐渐加快加液速度；(4)离心：将加入清洗液后的细胞冷冻液进行离心；(5)孵育：转移至T‑175培养瓶，温度为35‑40℃，CO2为3‑7％环境下孵育。本发明的优点在于：显著提高细胞的活率。