一种简易快速克隆植物基因的原位PCR技术
基本信息
| 申请号 | CN202011610133.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114686475A | 公开（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申请公布号 | CN114686475A | 申请公布日 | 2022-07-01 |
| 分类号 | C12N15/10（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 吴疆;周灵美;谢晓东 | 申请（专利权）人 | 天津农学院 |
| 代理机构 | - | 代理人 | - |
| 地址 | 300392天津市西青区津静路22号天津农学院农学与资源环境学院 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明的目的是提供一种基于原位PCR技术简便、快捷克隆植物基因的方法。本发明基于原位PCR技术，采用碱溶液与表面活性剂混合作为裂解液，比较了两种碱溶液和三种表面活性剂的裂解效果，从中选出了一种最佳的裂解液条件。相比传统PCR技术通过CTAB法和SDS法的繁琐步骤去除细胞内蛋白、多糖、RNA、盐类等杂质，提纯DNA或RNA进行扩增，程序复杂、耗时长，每次提取DNA时都需要大量实验材料与接触有害试剂，无法减少耗材与人力资源，且在提取过程中会造成DNA的损伤。本研究所用的方法无需提DNA或RNA，使用少量烟草叶片与常见实验试剂，即可短时高效裂解烟草叶片内表面细胞壁，使DNA分子裸露，为分子生物学提供了简便、快捷的提取方法，更为经济、高效。 |
