一种基于Vcre-Vloxp重组酶体系的基因编辑方法及其应用
基本信息
申请号 | CN202010840799.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111705079A | 公开(公告)日 | 2020-09-25 |
申请公布号 | CN111705079A | 申请公布日 | 2020-09-25 |
分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/89(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 赵金龙;朱石磊;李雯婧;林梓凡 | 申请(专利权)人 | 上海药康生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 巩克栋 |
地址 | 201204 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区张衡路200号2幢3层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供一种基于Vcre‑Vloxp重组酶体系的基因编辑方法及其应用,所述方法包括如下步骤:(1)将Vloxp序列连接于双链DNA的5′末端或3′末端,或者将所述Vloxp序列插入双链DNA的功能区之间;(2)再将所述双链DNA、Vcre蛋白和基因编辑的反应液混合,转入目的细胞中完成基因编辑。当双链DNA在整合过程中出现重复连接的现象时,会在Vcre蛋白的作用下被剪切,最终只剩下一个双链DNA,且无论多少个双链DNA发生串联,Vcre蛋白都能够切除从第一个Vloxp序列到最后一个Vloxp序列之间所有的重复片段,因此,所述方法能够明显降低重组DNA片段在整合过程中出现的串联重复现象。 |
