一种基于Vcre-Vloxp重组酶体系的基因编辑方法及其应用

基本信息

申请号 CN202010840799.0 申请日 -
公开(公告)号 CN111705079A 公开(公告)日 2020-09-25
申请公布号 CN111705079A 申请公布日 2020-09-25
分类号 C12N15/85(2006.01)I;C12N15/89(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 赵金龙;朱石磊;李雯婧;林梓凡 申请(专利权)人 上海药康生物科技有限公司
代理机构 北京品源专利代理有限公司 代理人 巩克栋
地址 201204 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区张衡路200号2幢3层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种基于Vcre‑Vloxp重组酶体系的基因编辑方法及其应用,所述方法包括如下步骤:(1)将Vloxp序列连接于双链DNA的5′末端或3′末端,或者将所述Vloxp序列插入双链DNA的功能区之间;(2)再将所述双链DNA、Vcre蛋白和基因编辑的反应液混合,转入目的细胞中完成基因编辑。当双链DNA在整合过程中出现重复连接的现象时,会在Vcre蛋白的作用下被剪切,最终只剩下一个双链DNA,且无论多少个双链DNA发生串联,Vcre蛋白都能够切除从第一个Vloxp序列到最后一个Vloxp序列之间所有的重复片段,因此,所述方法能够明显降低重组DNA片段在整合过程中出现的串联重复现象。