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一种结合激光技术的生物样本玻璃化冷冻解冻方法

基本信息

申请号	CN201910096921.5	申请日	-
公开（公告）号	CN109797147A	公开（公告）日	2019-05-24
申请公布号	CN109797147A	申请公布日	2019-05-24
分类号	C12N13/00（2006.01）I; C12N5/075（2010.01）I; C12N5/073（2010.01）I; A01N1/02（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	金波; 刘湘娟	申请（专利权）人	力盟低温医学（深圳）有限公司
代理机构	深圳市汉唐知识产权代理有限公司	代理人	刘志海
地址	518000 广东省深圳市坪山区坪山街道聚龙山片区金威源工业园C802
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种结合激光技术的生物样本玻璃化冷冻解冻方法。它包括S1、从细胞缓冲液中取出生物样本后浸置于含有纳米碳粒的冷冻液中并保持静浸状态至少1.5min，然后将包含有细胞样本的冷冻液的液滴转移至玻璃化冷冻载杆上，最后直接将玻璃化冷冻载杆浸入液氮中；S2、将玻璃化冷冻载杆从液氮中取出后，利用激光脉冲向液滴施加热量；S3、将解冻后的细胞样本顺序地在蔗糖浓度含量由大到小的多个解冻液中进行洗涤；S4、将复苏后的细胞样本转移至二氧化碳培养箱中进行培养。本发明采用低浓度的冷冻液对生物样本进行玻璃化冷冻保存处理、利用激光实现对生物样本的快速解冻处理并结合后续的复苏处理步骤，可极大地提高生物样本在低浓度的玻璃化保存液中的成活率以及发育潜能。