外源表达破伤风毒素受体结合区Hc的高密度发酵方法
基本信息
| 申请号 | CN201611256457.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106520870B | 公开（公告）日 | 2019-12-13 |
| 申请公布号 | CN106520870B | 申请公布日 | 2019-12-13 |
| 分类号 | C12P21/02;C07K1/20;C07K1/18;C12R1/19 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 魏琪;于蕊;张骞;徐俊杰;陈薇 | 申请（专利权）人 | 四川自豪时代药业有限公司 |
| 代理机构 | 成都高远知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 四川自豪时代药业有限公司;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
| 地址 | 620010 四川省眉山市经济开发区新区 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种外源高表达破伤风毒素受体结合区Hc的发酵方法，步骤如下：(1)取含有破伤风毒素受体结合区Hc核苷酸序列的工程菌，培养至OD600值为3.0‑5.0，得种子液；(2)取种子液，加入发酵培养基中培养，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min时，补料；(3)当OD600值为17时进行诱导表达，加入终浓度为0.2mM的IPTG，降温至28℃，继续补料，培养至OD600值为40‑50。本发明方可以高表达获得可溶性的破伤风毒素受体结合区Hc，且发酵工艺简便，成本低廉，可应用于大规模生产制备破伤风Hc亚单位疫苗，应用前景良好。 |
