一种外源高表达乳酸脱氢酶突变体的高密度发酵方法

基本信息

申请号 CN201811071121.X 申请日 -
公开(公告)号 CN109280652A 公开(公告)日 2019-01-29
申请公布号 CN109280652A 申请公布日 2019-01-29
分类号 C12N9/04;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 魏琪;张骞;邱鹏;蒋飞;王洪;罗红 申请(专利权)人 四川自豪时代药业有限公司
代理机构 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 四川自豪时代药业有限公司
地址 620010 四川省眉山市东坡区经济开发区新区
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种外源高表达乳酸脱氢酶突变体的高密度发酵方法,步骤如下:(1)取含有乳酸脱氢酶突变体核苷酸序列的工程菌,培养至OD600值为2.5~4.0,得种子液;(2)取种子液,加入发酵培养基中培养,至溶氧值及pH值快速上升,且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10%/min时,补料;(3)当OD600值为20~30时进行诱导表达,加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,降温至30℃,继续补料,培养至OD600值为70~90。本发明可大幅提高含可溶性乳酸脱氢酶突变体宿主菌的收获水平,且发酵工艺简便,成本低廉,可应用于大规模生产制备乳酸脱氢酶突变体,有很好的应用前景。