一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法

基本信息

申请号	CN201811069893.X	申请日	-
公开（公告）号	CN109280651A	公开（公告）日	2019-01-29
申请公布号	CN109280651A	申请公布日	2019-01-29
分类号	C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	魏琪;邱鹏;蒋飞;张骞;王洪;罗红	申请（专利权）人	四川自豪时代药业有限公司
代理机构	成都高远知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	四川自豪时代药业有限公司
地址	620010 四川省眉山市东坡区经济开发区新区
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法。该发明依赖于遗传资源Lactobacillus bulgaricus的乳酸脱氢酶基因，在此基础上进行点突变并对基因序列进行密码子优化后，连接到表达载体上，构建重组质粒并导入大肠杆菌中，重组乳酸脱氢酶突变体在大肠杆菌中获得了可溶性高表达，离心收集的菌体经高压均质机破菌后，粗酶液可在低温下存放5天，活性无明显衰减。通过本方法制备的重组乳酸脱氢酶突变体与未进行突变及序列优化的重组乳酸脱氢酶相比，表达量提高了五倍以上，且在高pH值下的活性损失更小，有更广的pH值适用范围。本发明在乳酸发酵制备及NAD/NADH循环中有广阔的应用前景。