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一种基于WST-8检测NAD

基本信息

申请号	CN202010520532.3	申请日	-
公开（公告）号	CN113774110A	公开（公告）日	2021-12-10
申请公布号	CN113774110A	申请公布日	2021-12-10
分类号	C12Q1/32（2006.01）I;C12Q1/00（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	白玉杰;张晓娟;孙海星;王建辉;林思妮;张艳;吴东颖;董红宇	申请（专利权）人	山东荆卫生物科技有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	261000山东省潍坊市峡山区怡峡街197号生命科学园D栋
法律状态	-

摘要

一种基于WST‑8检测NAD浓度的酶循环方法，其特征在于：首先将样品进行酸化、中和、离心处理得到NAD提取液，再进行酶循环反应；所述酶循环反应为乙醇在乙醇脱氢酶（ADH）的作用下氧化生成乙醛，同时NAD被还原为NADH，生成的NADH在电子耦合试剂1‑mPMS的作用下将WST‑8还原生成橙黄色的甲臜，它在450nm左右有最大吸收峰。根据反应体系中生成甲臜的速率与NAD量之间的线性关系，实现样品NAD浓度的快速、准确定量。所述方法适用多种生物样本，包括血清、血浆、尿液、组织液、细胞培养基、细胞、动物组织块等。所述方法测定样品中NAD浓度线性良好，且灵敏度高、准确度高、重复性好、检测成本低，有较高的科研与临床应用价值。