一种高效的血浆、红细胞、淋巴细胞NAD

基本信息

申请号 CN201910986885.X 申请日 -
公开(公告)号 CN112684160A 公开(公告)日 2021-04-20
申请公布号 CN112684160A 申请公布日 2021-04-20
分类号 G01N33/50(2006.01)I 分类 测量;测试;
发明人 白玉杰;董红宇;林思妮;孙海星;张晓娟;王建辉;张艳;吴东颖 申请(专利权)人 山东荆卫生物科技有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 261000山东省潍坊市峡山区怡峡街197号生命科学园D栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种NAD+检测方法,能快速灵敏地检测血浆、红细胞、淋巴细胞中的NAD+水平,属于分子生物学和医学检测领域。采用酶循环法原理,NAD+在乙醇脱氢酶(ADH)的作用下被还原为NADH,NADH在电子耦合试剂PMS的作用下将MTT还原生成蓝色的甲臜,通过酶动力学方法检测甲臜的生成速率,结合NAD+标准曲线即可获得样品中NAD+的量。主要包括以下步骤:样本制备、试剂制备、r‑SBFA制备、β‑NAD标准品制备、反应液制备、NAD+提取、干扰物质去除、NAD+检测和数据校准。本发明适用于哺乳动物血浆、红细胞、淋巴细胞中NAD+水平检测,独特的样本处理方法解决了样本干扰物质多NAD+难以检测的问题,并且具有检测限低、花费时间短、成本低的优点,适合高通量检测,易于推广使用,实用性较强。