一种人皮肤成纤维细胞提取方法及其培养基
基本信息
| 申请号 | CN201811304237.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109294981A | 公开（公告）日 | 2019-02-01 |
| 申请公布号 | CN109294981A | 申请公布日 | 2019-02-01 |
| 分类号 | C12N5/077 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 高戎戎;佟艳辉 | 申请（专利权）人 | 上海中溢精准医疗科技有限公司 |
| 代理机构 | 上海容慧专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 于晓菁 |
| 地址 | 200021 上海市黄浦区淮海中路622弄102室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种人皮肤成纤维细胞提取方法，其包括步骤：1）将人的真皮组织剪碎并用含0.25％IV型胶原酶和0.1％胰蛋白酶的混合酶溶液消化至大组织块消失后终止消化；2）过滤消化后的真皮组织，收集滤液，离心，弃上清，收集沉淀的细胞并接种于培养瓶中，用筛选培养基培养；3）培养至细胞融合度达到70％后更换部分筛选培养基为扩增培养基，继续培养；4）培养至细胞融合度达到90％后，传代培养，并更换全部培养基为扩增培养基。其中，筛选培养基的配方为：DMEM高糖培养基作为基础培养基，其中含有体积含量为8‑12％的澳洲胎牛血清，以及0.4‑0.6ng/mL的EGF和4‑6ng/mL的bFGF作为添加因子；扩增培养基的配方为：DMEM高糖培养基作为基础培养基，其中含有体积含量为8‑12％的澳洲胎牛血清。 |
