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一种生产正己醇工程菌的构建方法

基本信息

申请号	CN201210279050.9	申请日	-
公开（公告）号	CN103571783A	公开（公告）日	2014-02-12
申请公布号	CN103571783A	申请公布日	2014-02-12
分类号	C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P7/04(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	不公告发明人	申请（专利权）人	徐州瑞赛科技实业有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	221004 江苏省徐州市东三环同发家和园9-1-1701
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种生产正己醇的工程菌，其特点为包含梭菌属Fe-氢酶基因hydA（GenBank登录号：EU590683）和地衣芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因lic（GenBank登录号：AY225317）的重组基因hyd-lic构建的大肠杆菌工程菌。制备方法包括：hydA基因和lic基因分别克隆、PCR扩增，在连接酶作用下连接成为重组DNA的基因hyd-lic，连接到载体pTE28aT7，得到质粒pTE28aT7-hyd-lic，转化P.pastoriskM71感受态细胞，摇瓶发酵得到高产正己醇工程菌，以纤维素半水解物为底物发酵生产正己醇。本发明的工程菌酶活达83U/mL，发酵产物正己醇含量最高可达35g/L。