重组人载脂蛋白Pro-ApoAIm的制备方法

基本信息

申请号 CN03150703.4 申请日 -
公开(公告)号 CN100516216C 公开(公告)日 2009-07-22
申请公布号 CN100516216C 申请公布日 2009-07-22
分类号 C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 龚邦强;丁满生;张梅芳 申请(专利权)人 上海凯曼生物科技有限公司
代理机构 上海智信专利代理有限公司 代理人 凯惠医药科技(上海)有限公司;成都睿智化学研究有限公司
地址 201203上海市浦东新区张江高科技园区蔡伦路720弄3号楼302室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种构建人载脂蛋白AImilano表达基因的制备方法。该方法采用PCR引物制成pro-ApoAIm的基因,构建表达基因PET12a/PAPOAIm重组质粒再进行工程菌的构建,然后构建的工程菌在一定的发酵条件下发酵,进行pApoAIm的蛋白纯化,纯化的蛋白再制成pro-ApoAIm蛋白二聚体形式。本方法具有pro-ApoAIm比ApoAIm性质更稳定,在大肠杆菌表达体系中采用T7启动子表达载体pET12a,用IPTG诱导目的蛋白的生产,产生蛋白是包涵体,它能有效防止蛋白水解酶对异源蛋白的水解等特点。