一种构建人载脂蛋白AIm表达基因的制备方法
基本信息
申请号 | CN03150703.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN1519321A | 公开(公告)日 | 2004-08-11 |
申请公布号 | CN1519321A | 申请公布日 | 2004-08-11 |
分类号 | C12N15/12;C12N15/63;C12P21/00 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 龚邦强;丁满生;张梅芳 | 申请(专利权)人 | 上海凯曼生物科技有限公司 |
代理机构 | 上海开祺专利代理有限公司 | 代理人 | 上海凯曼生物科技有限公司;成都睿智化学研究有限公司 |
地址 | 200233上海市漕河泾高科技开发区田林路219号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种构建人载脂蛋白AImilano表达基因的制备方法。该方法采用PCR引物制成pro-ApoAIm的基因,构建表达基因PET12a/PAPOAIm重组质粒再进行工程菌的构建,然后构建的工程菌在一定的发酵条件下发酵,进行pApoAIm的蛋白纯化,纯化的蛋白再制成pro-ApoAIm蛋白二聚体形式。本方法具有pro-ApoAIm比ApoAIm性质更稳定,在大肠杆菌表达体系中采用T7启动子表达载体pET12a,用IPTG诱导目的蛋白的生产,产生蛋白是包涵体,它能有效防止蛋白水解酶对异源蛋白的水解等特点。 |
