一种重组变构胶原酶的制备方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201810851432.1 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108949730B | 公开（公告）日 | 2020-05-12 |
| 申请公布号 | CN108949730B | 申请公布日 | 2020-05-12 |
| 分类号 | C12N9/52;A61K38/48;A61P3/04;A61P17/02;A61P35/00;A61K8/66;A61Q19/00;A23L33/195 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 仓勇;张震;杜刚;陈福鼎 | 申请（专利权）人 | 杭州观苏生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 | 代理人 | 李振文 |
| 地址 | 200131 上海市浦东新区中国（上海）自由贸易试验区环科路999弄17号205室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及重组变构胶原酶的纯化方法及其应用，公开了一种制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法和所获得的产品。所述制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法包括采用特定宿主菌BL21(DE3)表达E451D单点突变ColH变构胶原酶蛋白，经低温菌种发酵诱导后，提高目的蛋白产量。通过五步纯化：Capto Phenyl HS疏水层析；Capto Q阴离子交换层析；CaptoOctyl疏水层析；Phenyl HP疏水层析；Source 15Q阴离子交换层析后，获得了纯度98％以上的目的蛋白。生物学实验结果表明，此工艺生产的突变胶原蛋白酶纯度高，稳定性好，与之前的胶原蛋白酶商品相比具有明显的优势，酶比活显著提高。 |
