基因工程菌的冻干保藏方法
基本信息
申请号 | CN202111282307.1 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN113817609A | 公开(公告)日 | 2021-12-21 |
申请公布号 | CN113817609A | 申请公布日 | 2021-12-21 |
分类号 | C12N1/04(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 朱天择;杨逸仙;焦湛东;张鈃 | 申请(专利权)人 | 苏州科正环保科技有限公司 |
代理机构 | 苏州常清专利代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 周浩平 |
地址 | 215500江苏省苏州市常熟高新技术产业开发区东南大道33号201-A5-2 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基因工程菌的冻干保藏方法,包括以下步骤:将水熊虫TDP蛋白的基因序列构建到pET‑28a表达载体上,获得已导入编码水熊虫TDP蛋白的序列的重组质粒;将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞中,获得已转化的菌液,将菌液涂布在LB培养基上;挑取前一日培养的单克隆菌落,将单克隆菌落接种至液体培养基中进行扩大培养,检测液体培养基中的菌液的吸光值,获取600nm波长处的吸光值在0.4‑0.6之间的待操作菌液;根据待操作菌液的吸光值,取每毫升10^9个细胞的待操作菌液进行离心,离心完成后清除上清液,取葡萄糖溶液对菌体沉淀进行吹息,获得混合液;将混合液转移至试管内,将试管放入冻干机,依次进行冷冻、真空抽干,从而完成冻干保藏。 |
