单细胞测序的建库方法

基本信息

申请号 CN201910868822.4 申请日 -
公开(公告)号 CN110438572A 公开(公告)日 2019-11-12
申请公布号 CN110438572A 申请公布日 2019-11-12
分类号 C40B50/06(2006.01)I; C12Q1/6869(2018.01)I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 孔培涛; 李奇; 陈亚庆; 杨圳; 蔡建飞 申请(专利权)人 上海其明信息技术有限公司
代理机构 北京金信知识产权代理有限公司 代理人 上海其明信息技术有限公司
地址 201210 上海市浦东新区张江高科技园区张江路665号907室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种单细胞测序的建库方法,其包括(a)对甲醛固定的细胞利用第一反转录引物进行细胞内反转录标记第一轮条形码(barcode);(b)利用连接反应,使用第二轮引物和第三轮引物标记第二轮和第三轮barcode;(c)裂解生成子文库,模板转换后,利用PCR富集模板;(d)利用index PCR标记第四轮barcode。本发明的建库方法采用固定的细胞或者细胞核作为实验材料,而不仅限于新鲜的样品,允许样品来源的复杂性,可以更为有效地利用样品。