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一种基于基因编辑的获得翅膀缺失的黑水虻的方法

基本信息

申请号	CN201910534977.4	申请日	-
公开（公告）号	CN112111527A	公开（公告）日	2020-12-22
申请公布号	CN112111527A	申请公布日	2020-12-22
分类号	C12N15/90;C12N9/22;A01K67/033;C12N15/11;C12N15/113	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	黄勇平;詹帅;王四宝;寇宗庆;许军	申请（专利权）人	江苏绿博低碳科技股份有限公司
代理机构	上海恒慧知识产权代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	陈传喜
地址	200032 上海市徐汇区枫林路300号4号楼
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种基于基因编辑的获得翅膀缺失的黑水虻的方法。其包括以下步骤：（1）将vestigial基因敲除的模板引物sgRNA1‑F和sgRNA2‑F分别和通用的反向引物进行PCR，将PCR产物回收纯化，即得模板sgRNA；（2）将所述的模板sgRNA进行体外大量扩增，获得单链状态的sgRNA；（3）将所述的单链状态的sgRNA和cas9蛋白混合，显微注射入黑水虻新产受精卵中；（4）将所述注射后的卵催青直到孵化，饲养，挑选翅膀缺失的个体。本发明成功利用基因编辑技术实现了翅膀发育基因的成功敲除，黑水虻翅膀的缺失。这种非转基因的育种养殖方式对于大规模饲养黑水虻中防止逃逸具有重要意义，为大规模安全饲养黑水虻提供坚实保障。