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一种基于探针熔解技术准确检测BRAF基因突变的方法

基本信息

申请号	CN201310026087.5	申请日	-
公开（公告）号	CN103103269A	公开（公告）日	2013-05-15
申请公布号	CN103103269A	申请公布日	2013-05-15
分类号	C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	戴鹏高;陈超;刘金辉;焦维丽;邹晖	申请（专利权）人	陕西佰美医学检验有限公司
代理机构	西安智邦专利商标代理有限公司	代理人	陕西北美基因股份有限公司;陕西佰美医学检验有限公司
地址	710069 陕西省西安市太白北路229号
法律状态	-

摘要

本发明提出一种基于探针熔解技术准确检测BRAF基因突变的方法，不仅节省了耗材，同时具有高灵敏度，高特异性的特点，检测结果更可靠。该方法包括以下步骤：（1）分子信标探针和模板扩增引物的设计及合成；其中设计的上游引物(27nt)为5’-TGTTTTCCTTTACTTACTACACCTCAG-3’，延伸阻滞引物(43nt)为5’-acGCTACAGTGAAATCTCGGACAACTGTTCAAACTGATGGGAC-3’，分子信标探针(35nt)为FAM-ccgcaTCGAGATTTCACTGTAGCTAGACCAtgcgg-BHQ2；（2）提取被测样本的基因组DNA；（3）配制反应体系；（4）PCR反应。