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一种肿瘤样品测序参考品的制备方法

基本信息

申请号	CN201810652316.7	申请日	-
公开（公告）号	CN108728516A	公开（公告）日	2018-11-02
申请公布号	CN108728516A	申请公布日	2018-11-02
分类号	C12Q1/6806;C12Q1/6869	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	沈伟强;胡文玮;孙春丽;田慧;焦海涛;史善甫;刘璐;叶佳慧;奚云;葛海鹏;陈悦科	申请（专利权）人	安徽鼎晶生物科技有限公司
代理机构	北京高沃律师事务所	代理人	刘奇
地址	236600 安徽省阜阳市太和县经济开发区和谐大道中科生物基地7号楼三层
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种肿瘤样品测序参考品的制备方法，属于高通量测序技术领域，所述方法包括以下步骤：对肿瘤细胞系进行单克隆培养获得单克隆细胞系并提取全基因组；测定等位基因频率测定；根据等位基因突变频率与目标等位基因突变频率确定稀释倍数；用阴性细胞倍比稀释所述单克隆细胞系获得混合细胞；提取混合细胞的全基因组，测定等位基因突变频率；根据混合细胞的等位基因突变频率与目标等位基因突变频率比较，细化倍比稀释的倍数，用阴性细胞稀释所述单克隆细胞系获得参考品。本发明所述方法采用对细胞株单克隆结合高通量测序确定细胞系的基因背景；使用多步骤逐步细化的倍比稀释法结合流式细胞仪对细胞精确计数，保证参考品制备的高度可重复性。