检测EGFR-T790M和EGFR-C797S顺反式突变构型的方法和探针

基本信息

申请号 CN202010726064.5 申请日 -
公开(公告)号 CN111662986A 公开(公告)日 2020-09-15
申请公布号 CN111662986A 申请公布日 2020-09-15
分类号 C12Q1/6886(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 唐东江;赵计昌;黄雅菁 申请(专利权)人 珠海圣美生物诊断技术有限公司
代理机构 北京超成律师事务所 代理人 珠海圣美生物诊断技术有限公司
地址 519000广东省珠海市香洲区同昌路266号3栋3层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种检测EGFR‑T790M和EGFR‑C797S顺反式突变构型的方法和探针,涉及基因检测技术领域。该方法包括分别使用选择性抑制T790野生型的探针和选择性抑制C797野生型的探针体系对样本进行PCR扩增,然后对各扩增产物进行测序,根据测序结果判定样本中T790和C797的突变构型。上述方法能够有效地区分T790M和C797S顺反式突变构型,特异性非常高,可以直接给出样本序列信息;同时还具有灵敏度高的优点,采用依次经偏向性扩增和非偏向性扩增的两段式PCR扩增,再采用低成本的Sanger测序可以检出低至0.1%的突变;NGS测序则可以在保障高灵敏度的同时通过降低测序深度降低成本。