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一种体外合成siRNA的纯化方法

基本信息

申请号	CN202111194960.2	申请日	-
公开（公告）号	CN113755546A	公开（公告）日	2021-12-07
申请公布号	CN113755546A	申请公布日	2021-12-07
分类号	C12P19/34（2006.01）I;C12N15/10（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	李萍;唐雪明;李学文	申请（专利权）人	硅羿科技（上海）有限公司
代理机构	苏州市中南伟业知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	王玉仙
地址	200000上海市浦东新区新场镇新浩路43号C区
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种体外合成siRNA的纯化方法。本发明的纯化方法具体指体外转录合成siRNA后进行纯化，得到高纯度的siRNA。具体操作流程：将带有T7启动子的DNA模板体外转录合成siRNA；DNaseI降解DNA模板，S1核酸酶降解单链DNA和RNA；磁珠纯化富集siRNA；核酸吸附柱进一步去除小于20nt的核酸、碱基，以得到纯度很高的siRNA。这种制备方式快捷、便宜，且产物的纯度比市场销售的siRNA体外转录试剂盒要高很多，避免了市售体外转录试剂盒得到的产物中有过多杂质，而使实验结果非常不稳定。极大的提高了体外转录制备siRNA的质量，提高实验效率，减少假阴性的实验结果，具有非常高的推广价值。