一种基于人工模拟核酸技术的增效PCR法富集DNA目标区域的方法

基本信息

申请号 CN201910029916.2 申请日 -
公开(公告)号 CN111424077A 公开(公告)日 2020-07-17
申请公布号 CN111424077A 申请公布日 2020-07-17
分类号 C12Q1/6876;C12Q1/6806 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 葛猛;余倩;夏霞宇;王宏伟 申请(专利权)人 北京福安华生物科技有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 北京福安华生物科技有限公司;葛猛
地址 100071 北京市丰台区海鹰路6号院31号中金环球大厦三层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于人工模拟核酸技术的增效PCR法富集DNA目标区域的技术。本发明保护由内侧引物对和外侧引物对组成的特异引物组;内侧上游引物包括区段Ⅰ和区段Ⅱ,内侧下游引物包括区段Ⅲ和区段Ⅳ;区段Ⅱ和区段Ⅳ针对某一靶序列;外侧上游引物和外侧下游引物中均具有非天然核苷酸。本发明还保护一种富集靶序列的方法:以含有靶序列的DNA为模板,采用特异引物组进行PCR扩增;PCR扩增的反应体系中具有配对脱氧核苷酸。本发明在增效PCR中的基础上,引入非天然碱基对尾巴引物设计,可以有效避免非特异扩增以及引物二聚体形成,能够极大的降低各种背景干扰,扩增效果近乎完美。本发明在大规模平行测序领域有很大的应用前景。