利用CRISPR/Cas12a系统靶向富集核酸目标区域的方法及其应用

基本信息

申请号 CN202010146552.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113355389A 公开(公告)日 2021-09-07
申请公布号 CN113355389A 申请公布日 2021-09-07
分类号 C12Q1/6806(2018.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6869(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 赵书红;付亮亮;杨翔;李新云;陈辉;周鹏 申请(专利权)人 广西扬翔股份有限公司
代理机构 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 肖阳
地址 537100广西壮族自治区贵港市江南工业园区城东大道与工业一路交汇处东北角
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种利用CRISPR/Cas12a系统靶向富集核酸目标区域的方法及其应用。该方法包括(1)设计第一和第二RNA,第一RNA除第一sgRNA分子,还含有第一互补序列,第二RNA除第二sgRNA分子,还含有第二互补序列,第一sgRNA分子和第一互补序列与目标区域上游互补,第二sgRNA分子和第二互补序列与目标区域下游互补;(2)与Cas12a蛋白混合获得复合物;(3)将复合物、核酸、逆转录酶、变性剂和dNTP混合孵育和变性,获得变性产物;(4)去除RNA和蛋白质,扩增获得富集产物。由此可简便、快捷实现目标区域的富集,应用于测序领域。