一种NGS核心酶Klenow片段的诱导纯化及质控方法
基本信息
| 申请号 | CN202210057159.1 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114085822A | 公开（公告）日 | 2022-02-25 |
| 申请公布号 | CN114085822A | 申请公布日 | 2022-02-25 |
| 分类号 | C12N9/12（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 胡佳佳;韩典霖 | 申请（专利权）人 | 济凡生物科技（北京）有限公司 |
| 代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人 | 李洋 |
| 地址 | 102208北京市昌平区回龙观街道龙祥制版工业园5号院4号楼济凡生物（北京）有限公司 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种NGS核心酶Klenow片段的制备方法及其应用。本发明提供的NGS核心酶Klenow片段的制备方法包括如下步骤：1）将Klenow片段表达载体转化宿主菌，得到重组菌；2）在所述重组菌的培养体系中添加0.5 mM的IPTG进行诱导培养，得到诱导后菌体；3）从所述诱导后菌体中纯化得到所述Klenow片段，所述纯化的方法依次包括如下步骤：PEI沉淀核酸、饱和硫酸铵沉淀目的蛋白、Ni2+柱富集目的蛋白、Q柱除去杂蛋白和残余核酸以及丁基疏水柱去除杂蛋白。通过实验证明：按照本发明方法制备得到的Klenow片段产量和纯度高，能更好的满足NGS的需求。 |
