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环状RNA hsa_circ_0008602双荧光素酶报告基因载体制备方法

基本信息

申请号 CN202010281350.5 申请日 -
公开（公告）号 CN111500610A 公开（公告）日 2020-08-07
申请公布号 CN111500610A 申请公布日 2020-08-07
分类号 C12N15/65;C12N15/66;C12N15/63 分类 -
发明人 张梦娇;袁奕;唐林香;李昂;何胜祥 申请（专利权）人 江苏同科医药科技有限公司
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人 江苏同科医药科技有限公司
地址 215000 江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A4楼405室
法律状态 -

摘要

摘要 一种环状RNA hsa_circ_0008602双荧光素酶报告基因载体制备方法，步骤(1)，通过cirbase数据库获取hsa_circ_0008602的全长序列，全基因合成构建入pUC57‑Amp载体；步骤(2)，设计一对同源重组引物，将目的序列从pUC57‑Amp载体上扩增出来；同时，对psiCHECK2骨架载体进行XhoI和NotI酶切线性化，通过琼脂糖凝胶对扩增产物和酶切产物进行纯化回收，再将扩增产物和酶切产物进行同源重组反应，得到重组产物；步骤(3)，将重组产物转入感受态细胞中，挑取单克隆进行电泳验证和测序鉴定，得到载体psiCHECK2‑8602。