一种外周血NK细胞的培养方法

基本信息

申请号 CN202110603612.X 申请日 -
公开(公告)号 CN113249321A 公开(公告)日 2021-08-13
申请公布号 CN113249321A 申请公布日 2021-08-13
分类号 C12N5/0783 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 占震锋;李庆静 申请(专利权)人 上海南滨江细胞生物科技有限公司
代理机构 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 代理人 王俊晓
地址 200000 上海市闵行区园美路58号3幢401室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种外周血NK细胞的培养方法,属于细胞培养技术领域,包括以下步骤:首先获取人体外周血,加入抗凝剂防止凝聚,加入细胞裂解液进行裂解,去除红细胞,得到混合细胞液,然后利用磁珠分选法去除混合细胞液中的CD3+淋巴细胞,获得CD‑淋巴细胞;然后加入细胞因子IL‑2和IL‑15进行初步培养,将初步培养细胞液接种到预先包被的培养瓶中,添加体积分数10%的自体血浆和终浓度为500IU/mL的IL‑2进行二次刺激;最后进行NK细胞的分选,得到纯度较高的NK细胞,本发明的培养方法能够有效扩增NK细胞,显著提高其表面活化受体的表达,从而增强其对肿瘤细胞的杀伤活性。