编码PCR二代测序建库方法、试剂盒及检测方法

基本信息

申请号 CN201710102701.X 申请日 -
公开(公告)号 CN108504649A 公开(公告)日 2018-09-07
申请公布号 CN108504649A 申请公布日 2018-09-07
分类号 C12N15/10;C12N15/11;C40B50/06;G06F19/24 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 黄新华;戴慧清 申请(专利权)人 金弗康生物科技(上海)股份有限公司
代理机构 上海市汇业律师事务所 代理人 陆红杰
地址 201321 上海市浦东新区康新公路3399弄25号楼5层504室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种编码PCR二代测序建库方法,步骤包括:1)提取DNA;2)用带随机分子编码序列的单端特异引物进行正向单链线性扩增反应;3)用对侧单端特异引物与公共接头引物构成引物对,进行单端特异指数扩增反应;4)用测序双端公共接头引物对进行指数扩增反应;5)定量质检,获得DNA文库。本发明还公开了用上述DNA文库进行测序检测的方法,及包含该DNA文库的编码PCR二代测序建库试剂盒。本发明通过将样品原始DNA模板序列在初始互补合成中进行编码,使测序结果可以根据编码溯源检出初始DNA模板的真实序列和真实检出分子数,从而显著降低了突变假阳性和假阴性。