突变基因的定量检测方法
基本信息
申请号 | CN201610353070.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN107435061B | 公开(公告)日 | 2022-01-18 |
申请公布号 | CN107435061B | 申请公布日 | 2022-01-18 |
分类号 | C12Q1/6869(2018.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 黄新华;戴慧清 | 申请(专利权)人 | 金弗康生物科技(上海)股份有限公司 |
代理机构 | 上海市汇业律师事务所 | 代理人 | 陆红杰 |
地址 | 201114 上海市闵行区恒南路1358号5幢1010室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种突变基因的定量检测方法,步骤包括:1)提取样本DNA;2)单链合成反应;3)微球捕获纯化;4)微球上的3’端保护性外切纯化反应;5)以步骤4)的产物为模板进行微球上的单链合成反应,分离去除微球;6)3’端保护性外切纯化反应;7)双端接头桥媒连接反应,并纯化;8)以前次纯化产物为模板,反复进行单链合成反应和3’端保护性外切纯化反应;9)定量,测序,判断突变基因。该方法以靶标基因片段为模板进行反复多循环单链合成反应,将原始模板上系列位点的碱基转化为互补序列,使靶标基因序列最大保真地转化合成,经多级单链合成后,获得测序所需的足量完整待测序列,如此提高了低比例突变基因的检测灵敏度和保真度。 |
