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突变基因的定量检测方法

基本信息

申请号	CN201610353070.4	申请日	-
公开（公告）号	CN107435061A	公开（公告）日	2017-12-05
申请公布号	CN107435061A	申请公布日	2017-12-05
分类号	C12Q1/68(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	黄新华;戴慧清	申请（专利权）人	金弗康生物科技（上海）股份有限公司
代理机构	上海浦一知识产权代理有限公司	代理人	丁纪铁
地址	201114 上海市闵行区恒南路1358号5幢1010室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种突变基因的定量检测方法，步骤包括：1)提取样本DNA；2)单链合成反应；3)微球捕获纯化；4)微球上的3’端保护性外切纯化反应；5)以步骤4)的产物为模板进行微球上的单链合成反应，分离去除微球；6)3’端保护性外切纯化反应；7)双端接头桥媒连接反应，并纯化；8)以前次纯化产物为模板，反复进行单链合成反应和3’端保护性外切纯化反应；9)定量，测序，判断突变基因。该方法以靶标基因片段为模板进行反复多循环单链合成反应，将原始模板上系列位点的碱基转化为互补序列，使靶标基因序列最大保真地转化合成，经多级单链合成后，获得测序所需的足量完整待测序列，如此提高了低比例突变基因的检测灵敏度和保真度。