用于扩增子测序的引物及两步PCR建库方法
基本信息
| 申请号 | CN201911101431.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110878334A | 公开（公告）日 | 2020-03-13 |
| 申请公布号 | CN110878334A | 申请公布日 | 2020-03-13 |
| 分类号 | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06;C12N15/11 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 刘继强 | 申请（专利权）人 | 北京康普森生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人 | 北京康普森生物技术有限公司 |
| 地址 | 102206 北京市昌平区生命科学园生命园路4号院4号楼7层701 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种用于扩增子测序的引物及两步PCR建库方法，该方法包括：1)提取待测物种样本的基因组DNA；2)在多重PCR正、反向引物的5’端分别连接通用引物序列，以基因组DNA为模板，进行第一轮多重PCR，得到两端带有通用引物序列的PCR产物；3)纯化第一轮PCR产物；4)在测序标签序列的两端分别连接与第一轮PCR通用引物序列相匹配的引物序列，获得携带标签序列的PCR产物，并以其为模板进行第二轮PCR；5)纯化PCR产物，质检合格后上机测序。本发明采用两步PCR法建库，降低了扩增子测序成本，使检测成本降50％以上，同时有效提升扩增子质量指标，即提高了位点检出率和数据均一性，有极高的经济价值。 |
