EGFR基因T790M突变数字PCR检测体系的优化方法及检测产品

基本信息

申请号 CN201811191489.X 申请日 -
公开(公告)号 CN109295227A 公开(公告)日 2019-02-01
申请公布号 CN109295227A 申请公布日 2019-02-01
分类号 C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12Q1/6851 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 赵新泰;王明;潘文健 申请(专利权)人 上海赛安生物医药科技股份有限公司
代理机构 上海海颂知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 上海赛安生物医药科技股份有限公司
地址 200436 上海市宝山区上大路1号文景楼2楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种EGFR基因T790M突变数字PCR检测体系的优化方法,检测体系包括上游引物、下游引物、野生型探针、突变型探针、野生型模板和突变型模板;野生型模板是酶切后的正常人体gDNA,突变型模板是酶切后的插入EGFR基因T790M突变片段的突变质粒;将突变型模板和野生型模板按一定的拷贝数比例配制成标准品,采用数字PCR以中突变频率标准品为模板进行反应,根据反应数据制作数据统计图,选定野生型的荧光区域和突变型的荧光区域。采用数字PCR以野生型模板为模板进行反应,确定背景阈值。通过本发明的EGFR基因T790M突变数字PCR检测体系的优化方法优化后的检测产品准确度更高。