一种纯化重组谷氨酰胺转氨酶的方法
基本信息
| 申请号 | CN201811647903.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109593741A | 公开（公告）日 | 2019-04-09 |
| 申请公布号 | CN109593741A | 申请公布日 | 2019-04-09 |
| 分类号 | C12N9/10（2006.01）I; C07K19/00（2006.01）I; C07K1/22（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 史百鸣; 王运龙; 卢雪峰; 李国莹; 陆瑞琪 | 申请（专利权）人 | 江苏一鸣生物股份有限公司 |
| 代理机构 | 苏州国卓知识产权代理有限公司 | 代理人 | 明志会 |
| 地址 | 225432 江苏省泰州市泰兴市根思一鸣路 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及提纯技术领域，尤其是一种纯化重组谷氨酰胺转氨酶的方法，包括以下步骤；步骤一、在重组谷氨酰转氨酶时，在重组谷氨酰转氨的酶的C端添加组氨酸标签；步骤二、使目的蛋白谷氨酰胺转氨酶结合在镍离子亲和柱中的填料上；步骤三、使用A溶液冲洗步骤二得到的溶液至基线平衡，除去填料中的非目的蛋白；步骤四、使用B溶液洗脱步骤三得到的溶液的目的蛋白；步骤五、将步骤四得到的蛋白洗脱液中含有的氯化钠和咪唑采用透析的方式除去，本发明使用镍离子交换柱纯化被体外活化的谷氨酰胺转氨酶对洗脱酶液，使用透析法脱去盐离子，处理条件温和，蛋白损失小，可以提高谷氨酰胺转氨酶的回收率，增加回收酶液的纯度。 |
