一种提高工程菌分泌表达重组人表皮生长因子的方法
基本信息
| 申请号 | CN201910915456.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110551199A | 公开（公告）日 | 2019-12-10 |
| 申请公布号 | CN110551199A | 申请公布日 | 2019-12-10 |
| 分类号 | C07K14/485（2006.01）; C12N15/70（2006.01） | 分类 | 有机化学〔2〕; |
| 发明人 | 钱永常; 张旭初; 宋叶华 | 申请（专利权）人 | 杭州纽龙日尚生物制品有限公司 |
| 代理机构 | 北京德琦知识产权代理有限公司 | 代理人 | 杭州纽龙日尚生物制品有限公司 |
| 地址 | 310018 浙江省杭州市经济技术开发区21号大街600号1号楼101室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种提高工程菌分泌表达重组人表皮生长因子的方法。所述方法包括下述步骤：(1)将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到种子培养液；(2)将所述种子培养液接种至MBL培养基中，培养，然后加入IPTG、甘氨酸、Triton X‑100，诱导，得到发酵上清液；和(3)从所述发酵上清液中分离和纯化重组人表皮生长因子。其中，诱导时，加入终浓度为0.1mM至0.3mM的IPTG；终浓度为按质量计0.2％至1.5％的甘氨酸，终浓度为按质量计0.002％至0.2％的Triton X‑100。本发明提高了hEGF的分泌量，缩短了发酵时间，从而降低了成本。 |
