一种改进的腺病毒载体系统及其病毒颗粒的制备和应用

基本信息

申请号 CN201310058765.6 申请日 -
公开(公告)号 CN103290052B 公开(公告)日 2016-02-03
申请公布号 CN103290052B 申请公布日 2016-02-03
分类号 C12N15/861(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈海旭;叶军 申请(专利权)人 江苏诺百生物科技有限公司
代理机构 上海申新律师事务所 代理人 上海诺百生物科技有限公司
地址 200233 上海市徐汇区桂平路333号5号楼301室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种改进的腺病毒载体系统和病毒制备方法,它是以pDONR221载体为初始载体进行改进,插入了多克隆位点和IRES-GFP片段。该系统结合了酶切连接和重组反应技术,既能高效构建载体,又降低了试剂成本。本发明还公开了后续病毒载体酶切后,纯化的改进方法,该方法摒弃了传统的酚:氯仿:异戊醇纯化法,而使用常规的DNA回收柱或直接加热灭活法,简单易行,缩短了操作时间,降低了材料成本,并且无需使用有毒的酚、氯仿试剂,利用这两个方面结合起来的腺病毒系统,制备效率提高,成本降低,在侵染细胞中仍然保持高效。