一种在斑马鱼基因组中实现定点插入式敲除与鉴定的方法

基本信息

申请号 CN202110318035.X 申请日 -
公开(公告)号 CN112921037A 公开(公告)日 2021-06-08
申请公布号 CN112921037A 申请公布日 2021-06-08
分类号 C12N15/113;C12N9/22;C12N15/89;C12Q1/686 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 郑永茂;肖诗伟;曾丽雯 申请(专利权)人 福州百维斯生物科技有限公司
代理机构 福州元创专利商标代理有限公司 代理人 饶文君;蔡学俊
地址 350007 福建省福州市仓山区建新镇金塘路9号第9号楼标准厂房四层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种在斑马鱼基因组中实现定点插入式敲除与鉴定的方法,利用Cas9蛋白,基因组靶向特异性导向RNA,辅以一条两端带有短同源臂,中间插入在斑马鱼基因组中无相似序列的通用型终止翻译序列,来实现高效、精确、定点和定向的斑马鱼基因组插入式敲除。同时,提供特异的插入片段检测用的引物,帮助实现基因敲除的快速检测。该方法克服了目前已有的随机敲除方法效率偏低、突变的随机性以及阳性鉴定难等问题。