PD‑1敲除EGFRvIIICAR‑T细胞的制备
基本信息
| 申请号 | CN201710538905.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN107338224A | 公开（公告）日 | 2017-11-10 |
| 申请公布号 | CN107338224A | 申请公布日 | 2017-11-10 |
| 分类号 | C12N5/10;C12N15/90 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 胡边;唐珂 | 申请（专利权）人 | 成都克里斯博生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京迎硕知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 张群峰;钱扬保 |
| 地址 | 610041 四川省成都市高新区益州大道北段388号8栋17层1711号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | PD‑1敲除EGFRvIIICAR‑T细胞的制备，包括将EGFRvIIICAR质粒及其转座酶质粒、用于敲除PD‑1基因的sgRNA质粒及CAS9质粒与电转试剂混合，加入PBMC细胞中进行电转染；采用偶联CD3或CD3+CD28抗体的磁珠富集CD3阳性T细胞；以及筛选并培养扩增转染后的T细胞以获得PD‑1敲除EGFRvIIICAR‑T细胞。本发明选用PiggyBac转座子系统提高了转染效率和转基因的表达效率和时间，简化CART的制备程序，增强了系统的负载量。另外，本发明敲除PD‑1基因时避免了使用病毒载体，安全性更高。 |
