一种敲除AAV受体的方法、敲除了AAV受体的HEK293细胞株及其应用

基本信息

申请号 CN201710553164.0 申请日 -
公开(公告)号 CN107245475B 公开(公告)日 2019-07-16
申请公布号 CN107245475B 申请公布日 2019-07-16
分类号 C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90;C12N7/00;C12R1/93 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李华鹏 申请(专利权)人 广州派真生物技术有限公司
代理机构 广州容大专利代理事务所(普通合伙) 代理人 广州派真生物技术有限公司
地址 511370 广东省广州市高新技术开发区揽月路3号科学城国际企业孵化器G栋304
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及基因工程和细胞学领域,具体涉及一种AAV受体敲除方法、敲除AAV受体的HEK293细胞株及其应用;所述被敲除的AAV受体为KIAA0319L;所述敲除方法包括:构建靶向AAVR基因组序列的sgRNA载体;转染293T细胞,培养得到各克隆细胞;Surveyor基因突变分析试验;选出AAVR突变的单克隆;再选择出高产AAV的AAVR突变细胞株;鉴定其它潜在突变位点的突变情况;把无其它突变位点的细胞株再扩大,建库以备生产。本发明的被敲除的AAV受体的HEK293细胞株生产AAV的最终产量比常规HEK293产量高出约50%。