一种人工设计的青霉素G酰化酶原及其编码序列与应用

基本信息

申请号 CN201710186321.9 申请日 -
公开(公告)号 CN108660127B 公开(公告)日 2021-09-21
申请公布号 CN108660127B 申请公布日 2021-09-21
分类号 C12N9/84(2006.01)I;C12N15/55(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P37/02(2006.01)I;C12P37/04(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘合栋;曹春来;梁雄基;黄国周 申请(专利权)人 珠海联邦制药股份有限公司
代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 代理人 裘晖;苏运贞
地址 519040广东省珠海市国家高新技术产业开发区三灶科技工业园
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种人工设计的青霉素G酰化酶原及其编码序列与应用。本发明通过将野生型青霉素G酰化酶原的底物结合口袋附近的大侧链氨基酸中的一个以上突变为比突变前氨基酸更小的侧链氨基酸,减少底物结合位阻效应,促使底物能迅速进入活性口袋;同时将活性口袋中与底物‑活性中心距离较近的关键亲水性氨基酸或弱疏水性氨基酸中的一个以上突变为疏水性比突变前氨基酸更强的氨基酸,增加底物结合口袋周围的疏水性,减少水分子结合,减少水解,从减少水解和增加合成两方面增加S/H,最终大幅提高青霉素G酰化酶合成阿莫西林的能力。本发明提供了目前为止S/H最高的青霉素G酰化酶原,其在阿莫西林合成中的潜力大。