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一种地龙蛋白的提取方法

基本信息

申请号 CN201710255679.2 申请日 -
公开（公告）号 CN107056881B 公开（公告）日 2017-08-18
申请公布号 CN107056881B 申请公布日 2017-08-18
分类号 C07K1/14(2006.01)I 分类 -
发明人 巩东辉;格日乐 申请（专利权）人 北京七清堂中医研究院
代理机构 北京正理专利代理有限公司 代理人 赵晓丹
地址 100083北京市海淀区中关村东路18号1号楼A-306室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种地龙蛋白的提取方法，包括以下步骤：1)取活体地龙，除杂，用液氮处理后进行粉碎；2)加入无水乙醇，浸泡，离心，去除上清；3)加入高氯酸溶液，浸提，离心，抽取上清；4)加入活性炭，搅拌并静置，离心，抽取上清；5)用磷酸缓冲液调节上清液pH值至5‑6，加入硫酸钠粉末，沉淀，得到地龙蛋白粗提物；6)将地龙蛋白粗提物用pH7.2 20mM Tris‑HCl缓冲液溶解，用DEAE‑Sephadex离子交换法纯化，收集洗脱成分，洗脱成分经透析、浓缩、冻干，即得。本发明制备方法简单、周期短，提取效果好、纯度高，得到的地龙蛋白可延长凝血酶时间，有效降低小鼠的BALF中EOS总数。