纯化丙酮酸激酶的方法
基本信息
| 申请号 | CN201010532789.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN102010854B | 公开（公告）日 | 2012-11-14 |
| 申请公布号 | CN102010854B | 申请公布日 | 2012-11-14 |
| 分类号 | C12N9/12 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 不公告发明人 | 申请（专利权）人 | 北京利德曼生化股份有限公司研发中心 |
| 代理机构 | 北京银龙知识产权代理有限公司 | 代理人 | 钟晶 |
| 地址 | 100176 北京市大兴区经济技术开发区兴海路5号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种纯化诊断用丙酮酸激酶的方法，其包括如下步骤：(1)将发酵液调节pH、匀浆，(2)稳定化处理，(3)热冷处理，(4)加酸碱处理，(5)用PEG(聚乙二醇)沉淀法将酶从含有杂离子的酶中沉淀出来，将沉淀重悬，继续用PEG沉淀法洗去其中残余的杂离子，(6)酶沉淀经重悬，加入单宁酸使残留的部分PEG和单宁酸结合生成沉淀并离心除去，上清经冷冻升华干燥获得符合试剂盒纯度要求的诊断酶。该方法简单易行，可以很方便地从含有钠、钾、氨等离子和杂蛋白的发酵粗酶液中将酶提纯出来，获得符合诊断原料要求的酶。该方法酶的得率高，杂离子水平可控制，无需上柱脱盐，无需透析，易于扩大生产。 |
